优秀研究生学位论文题录展示

nGLP-1R的原核表达及其肽库筛选

专 业: 微生物与生化药学
关键词: GLP-1受体 原核表达 肽库筛选
分类号: R971
形 态: 共 61 页 约 39,955 个字 约 1.911 M内容
阅 读: 全文阅读说明

内容摘要


GLP-1R(Glucagon like peptide-1 receptor)作为一种已知配体的GPCRs(G-protein coupled receptors),现已被广泛地应用于药物的高通量筛选,Eli Lilly &Amylin公司已经根据其天然配体Exendin-4设计开发出了世界首个“模仿肠降血糖素”治疗Ⅱ型糖尿病的药物-Exenatide(商品名Byetta)。

本研究以原核表达的大鼠nGLP-1R(N-terminal extracellular domain of GLP-1R)为靶标进行噬菌体展示肽库筛选以获得与GLP-1R有高亲和力的12肽,为进一步设计有效的抗糖尿病药物提供一定的结构信息。

本文首先采用原核表达的方式从大肠杆菌BL21(DE3)中获得nGLP-1R,并利用镍柱亲和层析和Native-PAGE制备电泳等蛋白纯化方法纯化获得nGLP-1R;然后经过western blotting、受体配体结合实验验证所表达的nGLP-1R具有活性。

在获得有活性且纯度较高的nGLP-1R基础上,本文利用噬菌体展示肽库技术,以nGLP-1R为靶标进行了噬菌体展示肽库筛选,结果获得了9条..……

全文目录


内容提要
第1章 前言
1.1 Ⅱ型糖尿病的研究
1.1.1 Ⅱ型糖尿病
1.1.2 Ⅱ型糖尿病治疗药物作用靶标的研究
1.2 GPCR 作为药物筛选靶标的研究
1.2.1 GPCR 简介
1.2.2 GPCR 作为靶标在药物筛选中的应用
1.3 GLP-1 受体及其激动剂EXENDIN-4 的研究
1.3.1 以GLP-1 受体为靶标进行肽库筛选的研究
1.3.2 Exendin-4 的研究进展
1.4 本课题研究意义
第2章 材料与方法
2.1 NGLP-1R 的原核表达、纯化及其鉴定
2.1.1 材料与试剂
2.1.2 溶液配制
2.1.3 主要仪器
2.1.4 实验方法
2.2 以 NGLP-1R 为靶标进行噬菌体12 肽库的筛选
2.2.1 材料与试剂
2.2.2 溶液配制
2.2.3 主要仪器
2.2.4 实验方法
2.3 多肽合成
2.3.1 材料与试剂
2.3.2 溶液配制
2.3.3 主要仪器
2.3.4 实验方法
2.4 筛选所得12 肽的体外活性测定
2.4.1 材料与试剂
2.4.2 溶液配制
2.4.3 主要仪器
2.4.4 实验方法
第3章 结果与讨论
3.1 NGLP-1R 的原核表达、纯化及其鉴定
3.1.1 nGLP-1R 的原核表达及纯化
3.1.2 nGLP-1R 的活性鉴定
3.1.3 小结
3.2 EXENDIN-4 模拟肽的筛选与合成
3.2.1 亲和筛选
3.2.2 重组噬菌体克隆测序及其氨基酸序列同源性比较
3.2.3 重组噬菌体克隆与nGLP-1R 的亲和力测定
3.2.4 筛选所得12 肽的合成、纯化及鉴定
3.2.5 小结
3.3 筛选所得12 肽的体外活性测定
3.4 结论
参考文献
中文摘要

相似论文

  1. 抗CD20嵌合抗体的构建、表达和功能研究以及CD20相互作用蛋白的初步研究,71页,R971
  2. 赤霉菌萜类代谢途径工程基础研究,124页,R971
  3. 白囊耙齿菌的液体发酵及其多糖抗肿瘤活性的研究,104页,R971
  4. 黄芩组织培养体系的建立及环境影响机制的初步研究,92页,R971
  5. 猪白介素15(IL-15)基因克隆及与胸腺素α1融合表达,62页,R971
  6. 云芝子实体多糖和菌丝体多糖的分离纯化研究,95页,R971
  7. 鱼腥藻PCC7120生物转化体系的初步构建及对三种中药有效成分的转化研究,69页,R971
  8. 新型钒化合物V-SIH或V-NIH降低1型糖尿病大鼠血糖及其细胞毒性的研究,75页,R971
  9. 藏药短管兔耳草的化学成分研究,46页,R971
  10. 可控酶解水蛭制备抗凝血肽的研究,83 页,R973.2 TQ461
  11. 美罗培南的合成研究与1,3,4-噻二唑碳青霉烯类新化合物的合成及抗菌活性测定,140页,R978.1
  12. 以Hsp90为靶点的细胞机制抗病毒药物合成与筛选,89页,R971
  13. 人细胞色素P450 1A2、2C9、2E1和3A4基因克隆及表达,89页,R971
  14. 孕烷X受体配体筛选模型与乙酰胆碱酯酶抑制剂筛选模型的构建,95页,R971
  15. 细菌生物被膜体外模型的建立及重组溶葡球菌酶对葡萄球菌生物被膜的体外清除作用,72页,R971
  16. 新型抗肿瘤抗生素力达霉素生物合成调控基因sgcR1和sgcR2的功能研究,63页,R979.14 R453.2 R818.051
  17. 第一部分 白色念珠菌β-1,3-葡聚糖合成酶抑制剂筛选模型的建立及研究;第二部分 白色念珠菌β-1,3-葡聚糖合成酶调节亚基CaRho的克隆表达,76页,R978.5
  18. 妥布霉素的生物合成基因簇中6-脱氢酶基因的研究,文章中图分类: > R971 > 医药、卫生 > 药学 > 药品 > 神经系统药物

    © 2012 book.hzu.edu.cn