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DNA损伤反应相关分子表达作为电离辐射生物标志物的研究

专 业: 放射医学
关键词: 电离辐射 DNA损伤 生物标志物 γ-H2AX p21
分类号: R73
形 态: 共 72 页 约 47,160 个字 约 2.256 M内容
阅 读: 全文阅读说明

内容摘要


随着核能应用的日益广泛和深入,核辐射事故的发生在所难免,各国也越来越重视核应用中的安全问题,纷纷建立和完善应对核辐射事故的应急机制。

其中,准确估算受照剂量是分级救治伤员的首要环节。

对公众而言,需要寻找检测灵敏、快速、可靠的生物样品作为辐射标志物来判定损伤严重程度,从而指导临床治疗,因此该领域的相关研究也受到越来越多的关注。

由于人体样本个体差异大、影响因素多,而且难以实现全身照射,使得研究结论不尽相同。

因此,本研究从体外培养的细胞株和动物实验入手,探讨DNA损伤反应相关分子作为电离辐射生物标志物的可行性。

结果发现Jurkat细胞γ-H2AX和p21蛋白表达在0~4 Gy范围内呈剂量依赖性升高;小鼠胸腺及脾细胞p21基因表达在0~6 Gy范围内呈剂量依赖性升高。

通过线性关系拟合,三者(γ-H2AX、p21蛋白及p21基因)在其各自的剂量范围内均有较理想的线性相关性,具有作为电离辐射生物标志物的可能..……

全文目录


内容提要
英文缩写词表
第1章 绪论
1.1 电离辐射
1.1.1 电离辐射生物效应
1.1.2 影响电离辐射生物效应的因素
1.2 电离辐射与DNA 损伤
1.2.1 DNA 损伤的种类
1.2.2 电离辐射诱导DNA 损伤的分子机制
1.3 生物剂量计
1.3.1 放射生物剂量学
1.3.2 生物剂量计
1.3.3 生物剂量计的应用
1.3.4 新型生物剂量计
1.4 γ-H2AX
1.4.1 H2AX 及H2A 组蛋白家族
1.4.2 H2AX 的磷酸化
1.4.3 γ-H2AX 与DNA 双链断裂
1.4.4 与H2AX 活化相关的蛋白
1.4.5 研究γ-H2AX 的意义
1.5 p21
1.5.1 p21 基因
1.5.2 p21 蛋白
1.5.3 p21 的生物学功能
1.5.4 电离辐射与p21
1.5.5 研究p21 的意义
1.6 核能与核辐射事故
1.7 立题依据
第2章 材料与方法
2.1 主要试剂及器材
2.1.1 试剂
2.1.2 器材
2.2 主要仪器
2.3 细胞株及实验动物
2.4 照射条件
2.5 试剂配制
2.6 检测照射后Jurkat 细胞γ-H2AX、p21 蛋白表达的时间效应
2.6.1 照射剂量和时间点
2.6.2 Jurkat 细胞悬液的制备
2.6.3 标记荧光抗体
2.6.4 流式细胞检测
2.7 检测照射后Jurkat 细胞γ-H2AX、p21 蛋白表达的剂量效应
2.7.1 时间点和剂量点的选择
2.7.2 Jurkat 细胞悬液的制备、标记荧光抗体和流式细胞检测方法
2.8 不同剂量照射后Jurkat 细胞凋亡的检测
2.8.1 制备细胞悬液
2.8.2 凋亡细胞染色
2.8.3 凋亡细胞的流式细胞术检测
2.9 p21 基因实时定量PCR 检测
2.9.1 时间点和照射剂量
2.9.2 胸腺和脾细胞总RNA 的提取及cDNA 合成
2.9.3 实时定量PCR 引物的设计合成
2.9.4 实时定量PCR 检测基因表达
2.9.5 实时定量PCR 数据分析
2.10 骨髓嗜多染红细胞微核镜检
2.10.1 骨髓细胞的采集
2.10.2 骨髓嗜多染红细胞标本制作
2.10.3 镜检
2.11 统计分析
第3章 实验结果
3.1 X 线照射后Jurkat 细胞γ-H2AX 蛋白表达的变化
3.1.1 X 线照射后Jurkat 细胞γ-H2AX 表达的时程变化
3.1.2 X 线照射后 Jurkat 细胞γ-H2AX 蛋白表达的量效变化
3.2 X 线照射后Jurkat 细胞p21 蛋白表达的变化
3.2.1 X 线照射后Jurkat 细胞p21 蛋白表达的时程变化
3.2.2 X 线照射后Jurkat 细胞p21 蛋白表达的量效变化
3.3 X 线照射后Jurkat 细胞凋亡的变化
3.3.1 不同剂量X 线照射后1 h Jurkat 细胞凋亡的变化
3.3.2 不同剂量X 线照射后8 h Jurkat 细胞凋亡的变化
3.3.3 不同剂量X 线照射后12 h Jurkat 细胞凋亡的变化
3.3.4 不同剂量X 线照射后24 h Jurkat 细胞凋亡的变化
3.4 除凋亡、坏死外正常细胞γ-H2AX、p21 蛋白表达的量效变化
3.5 X 线照射后p21 基因表达的量效变化
3.6 X 线照射后小鼠骨髓网织红细胞微核率的变化
第4章 讨论
4.1 X 线照射对γ-H2AX 表达的影响
4.1.1 不同时间X 线照射对γ-H2AX 表达的影响
4.1.2 不同剂量X 线照射对γ-H2AX 表达的影响
4.2 X 线照射对p21 表达的影响
4.2.1 X 线照射对p21 蛋白表达的影响
4.2.2 X 线照射对p21 基因表达的影响
4.3 γ-H2AX、p21 蛋白及p21 基因作为电离辐射生物标志物的探讨
4.3.1 γ-H2AX、p21 蛋白作为电离辐射生物标志物
4.3.2 p21 基因作为电离辐射生物标志物
结论
参考文献
中文摘要

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中图分类: > R73 > 医药、卫生 > 肿瘤学

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