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硅胶表面氨基比林分子印迹聚合物的制备及牛血清白蛋白亲和毛细管整体柱的应用

专 业: 生物化工
关键词: 分子印迹 氨基比林 表面接枝 壳聚糖 牛血清白蛋白 亲和整体柱 色氨酸对映体
分类号: Q512.1
形 态: 共 54 页 约 35,370 个字 约 1.692 M内容
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内容摘要


分子印迹技术是一种可以针对指定分子合成具有专一性识别位点聚合物的技术,它具有预定性、识别性和实用性等优点,近年来被广泛地应用于色谱分离、固相萃取、生物模拟传感器、膜分离等众多领域。

用光引发剂二乙基二硫代氨基甲酸钠对硅胶表面进行修饰,以氨基比林为模板分子,甲基丙烯酸为单体、乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,在修饰后的硅胶表面接枝共聚制备分子印迹聚合物。

利用红外光谱、电镜对聚合物进行了表征,用紫外分光光度法考察了分子印迹聚合物对氨基比林的吸附特性。

结果表明,与空白聚合物相比,该印迹聚合物具有较高吸附能力和选择识别能力。

Scatchard分析表明,聚合物中存在两种结合位点,特异性结合位点的平衡离解常数为0.035 mg\L,非特异性结合位点的平衡离解常数为0.769 mg\L。

该聚合物对模板分子及其结构类似物具有较强的分离能力,对氨基比林\安替比林和氨基比林\氨基安替比林的分离因子分别为35.5和15.4。

近几年,将整体柱技术应用于亲和色谱的研究获得了较快发展,产生了一种新型的亲和整体柱色谱分离分析技术。

以四乙氧基硅烷(TEOS)与壳聚糖为基质前体,十六烷基三甲基溴化胺(CTAB)为致孔剂,利用溶胶-凝胶法制备了壳聚糖\硅胶复合毛细管整体柱,然后采用戊二醛交联柱上键合牛血清白蛋白(BSA)得到亲和毛细管整体柱,以毛细管电色谱(CEC)模式分离色氨酸对映体,考察了缓冲液pH、浓度及有机修饰剂含量对分离过程的影响。

实验结果表明,在缓冲液的浓度为20 mmol\L,pH为7.5时,色氨酸对映体分离效果良好,分离度为2.44..……

全文目录


文摘
英文文摘
第一章 综述
1分子印迹技术
1.1 分子印迹技术的概况
1.2分子印迹技术的原理
1.3分子印迹聚合物的制备方法
1.4表面印迹合成方法和工艺
1.5基于硅胶表面修饰的分子印迹技术的应用
2 蛋白质亲和毛细管电色谱整体柱
2.1 毛细管电色谱
2.2亲和毛细管电色谱整体柱
2.3蛋白质亲和毛细管整体柱对手性对映体的分离
第二章 硅胶表面氨基比林分子印迹聚合物的制备及性能研究
1 实验部分
1.1 试剂
1.2硅胶表面印迹聚合物及非分子印迹聚合物的制备
1.3分子印迹聚合物吸附性能和分子识别性能的测定
2结果与讨论
2.1红外光谱分析
2.2印迹硅胶聚合物的扫描电镜分析
2.3等温吸附曲线
2.4采用Langmuir模型
2.5Scatchard模型
2.6印迹聚合物的选择性
3 小结
第三章 牛血清白蛋白亲和毛细管整体柱的制备及色氨酸对映体的分离
1 实验部分
1.1 仪器与试剂
1.2毛细管预处理
1.3毛细管整体柱基质的制备
1.4亲和整体柱的制备
1.5 电色谱实验
2结果与讨论
2.1整体柱的制备条件
2.2 BSA亲和整体柱电镜扫描图
2.3流动相pH值对色氨酸对映体分离的影响
2.4缓冲液浓度对手性分离的影响
2.5有机修饰剂对分离的影响
2.6重复性实验
3 小结
第四章 结论和展望
1 结论
2展望
附 录
参考文献

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中图分类: > Q512.1 > 生物科学 > 生物化学 > 蛋白质 > 单纯蛋白

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