优秀研究生学位论文题录展示

银杏雄株种质资源遗传多样性分析

专 业: 果树学
关键词: 银杏 雄株 种质资源 遗传多样性
分类号: S602.4  S664.3
形 态: 共 74 页 约 48,470 个字 约 2.319 M内容
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内容摘要


银杏雌雄异株,并在长期的演化中形成了不同的种质变异。

我国是银杏的故乡,具有丰富的银杏种质资源。

银杏种质资源是银杏研究与开发利用的重要物质支撑。

银杏雄株不仅在生态建设、观赏美化中具有重要作用,而且在核用授粉树配置、叶用及花用栽培中具有特殊的重要位置,其种质资源的类型直接关系到银杏雄株资源性状的表达,研究其遗传结构及其多样性对银杏雄株种质资源的开发利用具有重要理论与实践意义。

本研究连续两年分别于萌芽后30d采集我国银杏主要产区扬州市区、徐州地区及扬州大学银杏种质资源圃的91株银杏雄株的枝梢先端幼嫩叶片各100张,利用ISSR分子标记技术分析其遗传多样性,取得的研究结果主要有:

1、采用改良CTAB法提取的银杏基因组DNA条带清晰、完整、明亮,迁移率与入DNA相当,DNA浓度最小为652 ng\μl,A260\A280最小为1.75,最大为1.94,DNA纯度符合本研究ISSR-PCR扩增要求。

2、经对影响银杏雄株ISSR-PCR扩增效果的Taq酶、Mg2+、dNTP和引物用量等4个因素分别设计4个处理水平,并应用正交试验设计[L16(44)]筛选和优化,得到适于银杏ISSR-PCR分析的优化体系为:

模板DNA50 ng、10×buffer2μl、Taq酶1.0 U、Mg2+2.5 mmol\L、dNTP0.20 mmol\L和引物0.4μmol\L。

3、经用100个ISSR引物分别对91株银杏雄株进行扩增,筛选得到12个扩增条带较多、信号强、背景清晰的引物,其序列分别为(AC)8CG,(CA)8AG,(AC)8SG,(AC)8GA,(AC)8GG,(GA)8A,(GA)8C,(CA)8GT,(GACA)4,(AC)8CA,(CT)8G,(AC)8 YG。

4、筛选的12个引物对供试91株银杏雄株共扩增出94条DNA条带,其中多态性DNA条带56条,多态位点百分数(P)为59.57%,每个引物扩增条带5-11条,片段大小为200-2000 bp。

5、供试91株银杏雄株的平均有效等位基因数(Ne)为1.7149,平均基因多样度为(H)0.3966,平均Shannons信息指数(I)为0.5771,具丰富的遗传多样性。

6、供试91株银杏雄株的个体间的Neis距离在0.0443-0.9667之间,利用最长距离法进行系统聚类分析,取阈值为0.9434时,银杏雄株可分为I、II两类,其个体数分别为37和54;取阈值为0.6842时,银杏雄株可分为1、2、3、4、5五类,综合两种阈值的分类结果,其1、2类可为隶属于I类的亚类,分别包括6个和31个雄株;其3、4、5类可为隶属于II类的亚类,分别包括48个、2个和4个雄株。

7、扬州市区、徐州地区及扬州大学银杏种质资源圃三个银杏雄株群体总的遗传变异值(Ht)为0.3876,各群体内遗传变异值(Hs)为0.3470,不同群体间遗传分化系数(Gst)为0.1048,表明供试银杏雄株的总遗传变异中有10.48%的变异存在于群体间,而群体内的遗传变异为89.52%,明显高于银杏雄株群体间的遗传变异。

8、扬州市区、徐州地区、扬州大学银杏种质资源圃三个银杏雄株群体的平均有效等位基因数(Ne)分别为1.7199、1.5916、1.5520,平均基因多样度(H)分别为0.3964、0.3380、0.3066,平均Shannons信息指数(I)分别为0.5760、0.4964、0.4473,其Ne、H、I的大小顺序完全一致,银杏雄株遗传多样性水平均为扬州市区>徐州地区>扬州大学银杏种质资源圃。

9、扬州市区、徐州地区、扬州大学银杏种质资源圃三个银杏雄株群体的基因流(Nm)为4.2710,且群体间的遗传一致度也较高,说明群体间存在广泛的基因交流..……

全文目录


文摘
英文文摘
论文说明:符号与缩写
1前言
1.1研究目的和意义
1.2研究的现状与进展
1.2.1银杏性别分化特点与资源类型的研究
1.2.2银杏雄株的分布与生物学特性
1.2.3银杏雄株形态发育学研究
1.2.4银杏雄株种质资源多样性的研究
1.2.5银杏雄株种质资源的植物学与经济学性状评价研究
1.2.6银杏雄株资源的开发利用研究
1.3本研究拟解决的主要问题
2材料和方法
2.1试验材料
2.1.1银杏雄株的选定与管理
2.1.2银杏雄株叶片的取样与处理
2.2主要仪器和设备
2.3主要药品和试剂
2.4银杏雄株叶片基因组DNA的提取与纯化
2.5银杏基因组DNA质量的检测
2.6 PCR扩增
2.7 ISSR引物的筛选
2.8试验结果的整理与分析
3结果与分析
3.1银杏雄株叶片基因组DNA提取与质量检测
3.2银杏雄株ISSR-PCR反应体系的优化与建立
3.2.1正交设计的直观分析
3.2.2软件分析结果
3.2.3退火温度的确定
3.3银杏雄株ISSR标记的引物筛选
3.4银杏雄株ISSR标记的聚类分析
3.5银杏雄株遗传多样性的比较分析
3.6银杏雄株群体遗传多样性的比较分析
3.7银杏雄株群体间的遗传分化分析及聚类分析
4小结与讨论
4.1银杏雄株ISSR-PCR反应条件对遗传多样性分析结果的影响
4.2银杏雄株ISSR标记的聚类分析
4.3银杏雄株种质资源的遗传多样性分析
4.4三个银杏雄株群体的遗传分化分析
参考文献
附 录

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中图分类: > S602.4 > 农业科学 > 园艺 > 一般性问题 > 品种与种质资源(品种资源)
其他分类: > S664.3 > 农业科学 > 园艺 > 果树园艺 > 坚果类(壳果类)

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