优秀研究生学位论文题录展示

乳杆菌属胆汁盐水解酶的活性多样性、底物特异性及相关基因研究

专 业: 生物化工
关键词: 水解效率 胆汁盐水解酶 活性多样性 底物特异性
分类号: Q556
形 态: 共 64 页 约 41,920 个字 约 2.005 M内容
阅 读: 全文阅读说明

内容摘要


胆汁盐水解酶水解不同的胆汁盐会对人体产生不同的作用,水解初级胆汁盐会增加次级胆酸的产生,水解牛磺酸胆汁盐会游离出牛磺酸,进而增加硫化物的产生。

而水解次级胆汁盐和甘氨酸胆汁盐则不会产生上述危害作用。

而目前在筛选益生菌,评价益生性的实验中,很少考虑到益生菌对不同胆汁盐水解的不同效果,绝大多数研究只采用一种或两种胆汁盐来考察胆汁盐水解酶活性,而且对胆汁盐水解酶有害的方面缺乏研究,也不清楚不同种乳杆菌胆汁盐水解酶对六种不同人胆汁盐的水解效率方面的差别,所以目前对不同种乳杆菌的胆汁盐水解酶的研究还不够充分,增加对不同种乳杆菌胆汁盐水解酶差别的了解,特别是底物特异性方面的认识会对益生菌的筛选工作提供重要的参考和依据,同时也是进一步确定胆汁盐水解酶对菌株、对宿主的功能和作用的重要判断依据。

在本实验中,我们定量测定了8个种共16 株乳杆菌对于模拟人胆汁盐的胆汁盐水解酶比酶活并进一步测定了16 株乳杆菌对六种人胆汁单盐(GC,GDC,GCDC,TC,TCDC和TDC)的胆汁盐水解酶比酶活。

本实验结果表明,8种乳杆菌各有特点,其中首次发现L.helveticus、L.fermentum和 L.galllinarum 只具有牛磺酸胆汁盐水解活力而不具有甘氨酸胆汁盐水解活力,这说明这三种胆汁盐水解酶只识别氨基酸侧链而不受类固醇核心的影响。

这个新发现进一步证实了微生物的胆汁盐水解酶不仅能够识别固醇侧链而且能够识别氨基酸侧链。

在八种乳杆菌中,L.acidophilus具有最高的模拟人胆汁盐和GC、GDC、GCDC、TCDC、TDC的水解能力,L.acidophilus 对于甘氨酸胆汁盐的水解活力比牛磺酸胆汁盐的水解活力高10 倍以上,并且四株 L. Acidophilus菌株对模拟人胆汁盐的水解活力相差很大,比酶活范围从336.5 Umg-1到 776.4Umg-1,相差一倍以上。

与 L.acidophilus 不同,L.plantarum菌株间胆汁盐水解酶的比酶活相差不大,而且L.plantarum菌株对于不同人胆汁单盐的水解活力也没有明显差别。

L.gasseri Am1 表现出了最高的TC 降解能力,L.gasseri的胆汁盐水解酶活性受到胆汁盐氨基酸侧链和类固醇核心的共同影响。

L.casei和L.salivarius菌株没有表现出任何胆汁盐水解酶活性。

我们还发现,相比在MRS培养基中,L.gasseri和 L.acidophilus的胆汁盐水解酶活力在MRSB 培养基中出现了很大程度的下降(最大下降 80%),而其他菌株则没有出现类似的下降。

L.gasseri和 L.acidophilus的胆汁盐水解酶活性远远高于其他菌株,之前有研究表明胆汁盐的存在能影响酶活力,这其中是否存在必然的联系还有待于进一步的研究发现和证实。

不同胆汁盐水解酶基因的比对表明LA-bshA,LA-bshB,LG-bsh和 LP-bsh1具有高的相似度(高于45%),LP-bsh2,LP-bsh3和 LP-bsh4 同其他胆汁盐水解酶基因(LA-bshA,LA-bshB,LG-bsh and LP-bsh1)的相似度比较低(低于 26.3%) 。

根据以前的研究结果和本实验的序列分析推测,LP-bsh2,LP-bsh3和 LP-bsh4 可能不编码胆汁盐水解酶。

不同胆汁盐水解酶基因的比对发现胆汁盐水解酶基因活性位点的碱基序列是严格保守的,但是结合侧链则是不完全保守的,这一定程度上解释了乳杆菌胆汁盐水解酶在底物特异性方面的差别..……

全文目录


文摘
英文文摘
第一章 前 言
第二章 课题的研究意义和研究方案
第三章 乳杆菌胆汁盐水解酶酶活测定
第四章 乳杆菌bsh 基因的PCR 扩增及序列分析
第五章 乳杆菌bsh 基因敲除
第六章 结论与展望
参考文献

相似论文

  1. 微生物酯酶的分离纯化及其酶学特性的研究,70页,Q556 Q814.1
  2. 气单胞菌产几丁质酶的工艺条件优化和应用初探,69页,Q556
  3. 超滤法提取鸡蛋清溶菌酶的研究,64页,Q556.2 TQ028.8
  4. 从鸡蛋清中提取溶菌酶的研究,60页,Q556
  5. 人参皂苷糖基水解酶的研究,117页,Q556
  6. 核酸酶P1的纯化与性质研究,42页,Q556
  7. 有机溶剂体系中葡萄糖苷酶催化芳基烷醇糖苷化反应的研究,48页,Q556.2
  8. 新型环氧化合物水解酶的纯化、表征及应用研究,56页,Q556
  9. 碱性脂肪酶的研究,69页,Q556
  10. 中空海藻酸钙微胶囊的性质及其固定化枯草杆菌生产纳豆激酶的研究,87页,Q55
  11. 甘油单-二酰酯脂肪酶基因的克隆和表达,73页,Q556 Q78
  12. 纳豆激酶液体发酵过程的优化以及层析法纯化细胞色素P450〈,BM-3〉的研究,73页,Q55
  13. 少根根霉脂肪酶基因的表达和定向进化研究,135页,Q556 Q785
  14. 固定化黄孢原毛平革菌生产木素过氧化物酶及其对染料脱色降解的研究,66页,Q554.6 TQ61
  15. 新型单胺氧化酶荧光探针的研究,47页,Q554.9 O657.34
  16. 精氨酸脱亚氨基酶的分离及固定化,42页,Q554.4
  17. 合成2-甲基吡嗪的新型催化剂的研究,72页,Q55
  18. 人Ⅰ型精氨酸酶基因的克隆及表达,54页,Q55 Q78
  19. 用于有机相中催化反应的脂肪酶固定化,83页,Q55
  20. 基因重组大连蛇岛蝮蛇类凝血酶的制备与性质表征,147页,Q557
中图分类: > Q556 > 生物科学 > 生物化学 > 酶 > 水解酶

© 2012 book.hzu.edu.cn