优秀研究生学位论文题录展示

DNA错配修复与儿童胚胎性肿瘤关系的研究

专 业: 儿科学·分子生物学
关键词: 儿童胚胎性肿瘤 DNA错配修复 hMLH1基因 基因启动子 甲基化状态
分类号: R73
形 态: 共 85 页 约 55,675 个字 约 2.663 M内容
阅 读: 全文阅读说明

内容摘要


研究目的:

通过研究以肾母细胞瘤和神经母细胞瘤为代表的儿童胚胎性肿瘤中的微卫星不稳定性状态,从整体上评价DNA错配修复系统与该类肿瘤的关系。

进而初步探讨错配修复基因hMLH1序列变化和启动子甲基化与该类肿瘤发生的关系及作用机制。

研究对象:1994年~2005年首都儿科研究所病理确诊的肾母细胞瘤和神经母细胞瘤手术切除冰冻肿瘤标本各15例,作为研究组;正常人外周血标本15例,作为对照组。

研究方法:

酚\氯仿法提取冰冻肿瘤组织及外周血DNA。

采用PCR扩增,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,选取5个微卫星位点BAT25、BAT26、D2S123、D2S136及D2S367,评价30例肿瘤标本的MSI状态。

用PCR一单链构象多态性(SSCP)分析方法结合:

PCR直接测序及T-A克隆测序研究hMLH1基因19个外显子,进行突变筛查及确定。

用甲基化特异性PCR(MSP)技术研究hMLH1基因启动子的甲基化状态。

实验结果:

①30例儿童胚胎性肿瘤中,6例肿瘤出现微卫星不稳定性,MSI总阳性率为20%。

其中包括3例肾母细胞瘤和3例神经母细胞瘤,两种肿瘤的MSI阳性率各为20%。

1例神经母细胞瘤中大于2个位点出现MSI,为微卫星高度不稳定性(MSI-H)肿瘤。

②2例肾母细胞瘤中存在hMLH1基因突变,1例位于19号外显子的编码区,在此区域共发现3个点突变,分别为:

K732K(aaa→aag),L741P(ctg→ccg),N745D(aac→gac);另1例位于6号内含子剪接位点的受体位点,此区域有2个剪接突变,分别为:

IVS6-11T>C和IVS6-7T>C。

③在hMLH1基因发现2个单核苷酸多态性(SNP)位点,分别为位于8号外显子的A20499G和位于14号内含子的A50677G(依据Genebank:

AY217549编号)。

在20499位碱基4例肿瘤患者为A\G杂合(13.3%,4\30),15例正常人及其他肿瘤患者均为A\A纯合;在50677位碱基5例肿瘤患者为A\G杂合(16.7%,5\30),15例正常人及其他肿瘤患者均为A\A纯合;其中4例肿瘤在2个SNP位点同时出现A\G杂合。

在肿瘤组A\G杂合出现频率高于对照组,提示这2个SNP可能对儿童患胚胎性肿瘤的风险评估是有用的参考位点。

④甲基化特异性PCR研究发现,30例儿童胚胎性肿瘤中hMLH1基因的启动子均为非甲基化的,未发现该基因启动子甲基化与这两种儿童胚胎性肿瘤发生的相关证据。

结论:

本研究中20%儿童胚胎性肿瘤中存在微卫星不稳定性现象,提示该类肿瘤存在基因组不稳定性。

DNA错配修复基因hMLH1的突变存在于2例肾母细胞瘤中,可能与肾母细胞瘤的发生有关,15例神经母细胞瘤中未发现hMLH1基因的突变,不能排除其它DNA错配修复系统组分异常的存在。

本研究提示DNA错配修复缺陷与儿童胚胎性肿瘤发生有关,具体作用机制有待于进一步研究..……

全文目录


论文说明:英文缩略词对照表
中文摘要
英文摘要
前言
材料和方法
实验结果
讨论
小结
参考文献
综述一:人类DNA错配修复系统与肿瘤的研究进展
综述二:DNA甲基化——肿瘤产生的一种表观遗传学机制

相似论文

  1. 重组p21ras蛋白的表达、鉴定与纯化及其多克隆抗体的制备,88页,R7 Q78
  2. Survivin基因靶向RNA干扰重组表达载体构建和测序,32页,R703.2
  3. 产程中电子胎心监护晚期减速图形的数据还原和计算机分析,55页,R71
  4. 单细胞聚合酶链反应用于胚胎种植前诊断的实验研究,54页,R71
  5. 晚卵泡期性激素变化及其对排卵障碍的预测价值探讨,24页,R71
  6. 晚卵泡期血清孕激素对体外受精-胚胎移植结局的影响及其机制的初步探讨,39页,R71
  7. Leptin及其受体在人卵巢中的表达及作用,45页,R71
  8. 67kDaLN-R在卵巢癌组织中的表达及其反义核酸治疗卵巢癌的实验研究,86页,R71
  9. 妊娠早期子宫微环境趋化因子表达及其生物学意义的研究,86页,R71
  10. 金喜素/顺铂用于上皮性卵巢癌一线化疗的临床研究,43页,R71
  11. 小鼠囊胚玻璃化冷冻研究及超微结构观察,69页,R71
  12. HIV-1宫内传播相关因素研究,95页,R71
  13. 妊娠期肝内胆汁淤积症患者胎盘上缺氧诱导因子的初步研究,88页,R71
  14. 外周血sICAM-1浓度和胎盘组织VEGF PLGF Flt-1、sFlt-1mRNA的表达与妊高征发病的关系,54页,R71
  15. 超声造影剂介导PTEN基因影响卵巢癌的实验研究,80页,R71
  16. 人类辅助生殖技术中种植前诊断的动物实验研究及临床前期研究,67页,R71
  17. 胰岛素样生长因子IIGF-I对卵泡发育调控作用的研究,95页,R71
  18. 细胞因子在子宫内膜异位症免疫学发病机制中作用的研究,88页,R71
  19. 输卵管积水对体外受精-胚胎移植IVF-ET结果的影响及机理探讨,50页,R71
  20. 安徽某农村地区妇女智力缺陷现况及其生殖健康危害研究,65页,R71
中图分类: > R73 > 医药、卫生 > 肿瘤学

© 2012 book.hzu.edu.cn