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染料荧光探针与蛋白质、核酸相互作用的研究

专 业: 物理化学
关键词: 荧光分析法 碱性品红 牛血清白蛋白 DNA 偶氮氯膦(I) 荧光猝灭法 铝试剂
分类号: O65
形 态: 共 65 页 约 42,575 个字 约 2.037 M内容
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内容摘要


本文提出以染料碱性品红和偶氮氯膦Ⅰ作为蛋白质的探针,碱性品红和铝试剂作为核酸探针。

研究结果表明:

1 研究了以三苯甲烷类阳离子染料碱性品红(RL)与牛血清白蛋白(BSA)的结合模型,发现结合反应符合Pesavento提出的相分配模型,求得不同温度下RL与BSA相互作用的结合常数,依据热力学常数确定了RL与BSA之间的作用力类型为疏水作用力。

以RL为荧光探针建立蛋白质的定量分析方法。

在近中性范围内,碱性品红与蛋白质有较强的结合,该产物的荧光强度与蛋白质的量呈线性相关关系。

线性响应范围为0.02~5.0μg

mL,最低检出限可达19.6μg

L,用于实际样品中蛋白质含量的测定,结果满意。

2 以三苯甲烷类阳离子染料碱性品红(RL)为荧光探针建立DNA的定量分析方法。

在近中性范围内碱性品红与DNA有较强的结合,生成复合物的荧光强度与DNA的量成线性上升关系,线性响应范围为0.048~33.0μg

mL(r=0.9904),检测限38.9μg

L。

并用于样品中DNA含量的测定,得到满意的结果,并对作用机理进行了探讨,认为RL与DNA相互作用存在插入结合形式。

3 在pH..……

全文目录


摘要
第1章 绪论
1.1 引言
1.2 蛋白质探针的类型及研究进展
1.3 核酸探针的类型及研究进展
1.4 展望
参考文献
第2章 理论部分
2.1 蛋白质与探针分子相互作用模型
2.2 核酸与探针分子相互作用机理
2.3 表观结合常数和热力学参数
2.4 猝灭机理
参考文献
第3章 实验部分
3.1 实验仪器
3.2 试剂
3.3 实验方法
参考文献
第4章 结果与讨论
4.1 碱性品红与牛血清白蛋白的相互作用及其应用
4.1.1 碱性品红的荧光光谱
4.1.2 实验条件对结合反应的影响
4.1.3 工作曲线
4.1.4 共存物质的干扰
4.1.5 样品的测定
4.1.6 RL与BSA的相互作用的研究
4.1.7 小结
参考文献
4.2 碱性品红与DNA相互作用的研究
4.2.1 碱性品红的荧光光谱
4.2.2 实验条件的优化
4.2.3 工作曲线
4.2.4 干扰成分的影响
4.2.5 样品的测定
4.2.6 作用机理
4.2.7 小结
参考文献
4.3 偶氮氯膦(Ⅰ)与蛋白质的相互作用及分析应用
4.3.1 荧光光谱
4.3.2 实验条件的优化
4.3.3 影响荧光强度的因素
4.3.4 工作曲线
4.3.5 样品的测定
4.3.6 猝灭机理
4.3.7 复合物形成常数及作用力的确定
4.3.8 小结
参考文献
4.4 铝试剂与核酸相互作用的研究
4.4.1 荧光光谱
4.4.2 试验顺序的影响
4.4.3 缓冲液用量的影响
4.4.4 铝试剂用量的影响
4.4.5 离子强度的影响
4.4.6 表面活性剂的影响
4.4.7 核酸的工作曲线
4.4.8 干扰离子的影响
4.4.9 各种DNA样品的测定
4.4.10 与一些经典方法的比较
4.4.11 小结
参考文献

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中图分类: > O65 > 数理科学和化学 > 化学 > 分析化学

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