优秀研究生学位论文题录展示

鳞翅目昆虫FXPRLamide神经肽的组织学定位及功能研究

专 业: 遗传学
关键词: DH-PBAN基因 FXPRLamide神经肽 表达定位 功能 棉铃虫
分类号: Q963
形 态: 共 73 页 约 47,815 个字 约 2.287 M内容
阅 读: 全文阅读说明

内容摘要


以鳞翅目Lepitoptera的昆虫为研究对象,对滞育激素diapause hormone,DH-信息素生物合成激活肽pheromone biosynthesis activating neuropeptide,PBAN基因的表达定位、表达变化及其功能进行了研究。

在家蚕中,DH已知是诱导胚胎发育停滞的神经肽,但是在其它昆虫,DH的功能尚不清楚。

PBAN的功能是促进鳞翅目昆虫的性信息素的生物合成。

DH-PBAN基因编码五个神经肽:

DH,PBAN,α-、β-和γ-SGNP。

这些神经肽都具有相同的C末端:

FXPRLamide,所以归属于FXPRL家族神经肽。

根据cDNA序列,合成棉铃虫Helicoverpa armigera和家蚕Bombyxmori的滞育激素及棉铃虫信息素生物合成激活肽,制备抗体,Western-blot和免疫组化方法检测DH-PBAN基因在蛋白水平上的表达、分布、合成及释放;原位杂交方法定位DH-PBAN mRNA在咽下神经节suboesophageal ganglion,SG的3簇神经分泌细胞;酶联免疫反应ELISA检测体液中DH-PBAN的滴度;生理学实验推测了棉铃虫DH-PBAN基因可能的新功能。

结果表明,棉铃虫从胚胎、幼虫、蛹到成虫的整个世代,DH-PBAN基因都在咽下神经节的上颚、下颚和上唇神经元中表达,通过心侧体corpus cardiacum,CC和末端腹神经节terminal abdominal ganglion,TAG释放。

滞育与非滞育个体之间DH-PBAN基因的表达差异说明这些神经肽可能参与昆虫生长发育的调节。

脑和SG的摘除及DH-PBAN在thoracic gangliaTG中的表达证实了这种调节功能。

幼虫时期DH-PBAN基因产物----FXPRLamide神经肽和蜕皮激素的注射可显著延长龄期,血淋巴中FXPRLamide神经肽和蜕皮激素含量的变化说明两者对六龄幼虫生长的调节作用,且FXPRLamide神经肽可能通过调节前胸腺蜕皮激素的合成和/或释放而起作用。

家蚕胚胎时期免疫组化结果表明脑、SG及TGs中均有阳性反应,DH也通过CC和TAG释放。

DH-PBAN基因主要表达在SG的上颚、下颚和上唇神经元,SG的一对侧边细胞和TGs的一对腹中线细胞中也有表达。

幼虫时期的原位杂交结果和RT-PCR证实了这种新的分布。

此外,免疫组化结果还证实了柞蚕、蓖麻蚕和甜菜夜蛾中DH-PBAN类似肽的存在……

全文目录


缩略词表
中文摘要
英文摘要
前言
1.神经肽的生物学
1.1生物合成
1.2表达
1.3释放
1.4神经肽受体NPR
1.5神经肽的神经调节及激素作用
2.昆虫神经肽的概述
3.FXPRLamide神经肽家族
3.1 Pyrokinins和myotropins
3.2 DH-PBAN基因编码的FXPRLamide神经肽
材料与方法
1.昆虫材料及样品收集
2.抗体的制备
2.1抗原的制备
2.2免疫动物
2.3抗血清的收集
3.斑点免疫
4.Western-blot
4.1样品制备
4.2聚丙烯酰胺凝胶电泳
4.3凝胶染色步骤
4.4转膜
4.5杂交
5.免疫组化
6.原位杂交
6.1探针的制备
6.2原位杂交步骤
7.总RNA的分离提纯
8.RT-PCR
8.1反转录合成第一链cDNA
8.2聚合酶链式反应
9.酶联免疫吸附测定
10.生理实验
11.蜕皮激素含量的测定
11.1样品的处理
11.2样品的检测
12.数据的统计和分析
结果与讨论
1.对棉铃虫FXPRLamide肽的研究
1.1组织学定位研究
1.2功能研究
2.家蚕等其他鳞翅目昆虫中FXPRLamide神经肽的定位研究
2.1家蚕胚胎时期DH-PBAN基因的组织学定位研究
2.2柞蚕,蓖麻蚕和甜菜夜蛾中DH-PBAN类似肽的签定
分析总结
参考文献

相似论文

  1. 棉铃虫促前胸腺激素(PTTH)的表达与发育调节的研究,26页,Q963 S435.622.3
  2. 棉铃虫滞育激素基因启动子分析,54页,Q963
  3. 昆虫保幼激素降解酶基因的分子克隆、发育表达、功能分析及肽类激素的表达定位研究,102页,Q963 S881.2
  4. 昆虫促前胸腺激素和滞育激素-性信息素合成激活肽基因的结构、表达及功能,101页,Q963 S433.4
  5. 黑腹果蝇ebony缺失突变和Dfak内含子缺失的发现及其特征分析,116页,Q963
  6. 伊米果蝇种组系统进化关系及银额果蝇Cytb基因地理分化的研究,61页,Q963 Q969.453.1
  7. 灰飞虱免疫相关基因及微管蛋白基因的克隆和分子鉴定,75页,Q963 S435.42
  8. 昆虫滞育激素—性信息素合成激活肽基因的结构特性、发育表达、功能的分析及其转录调控机理的研究,114页,Q963
  9. 黑腹果蝇种组的核型研究,71页,Q969.462.1
  10. 昆虫细胞--人生长激素表达系统的分子遗传学研究,41页,Q96
  11. 东北地区中生代长翅目昆虫化石研究,81页,Q961 Q911.28
  12. 拟果蝇(D.simulans)Cu/Zn-SOD基因反转录序列的发现及初步分析,47页,Q969.462.2 Q343
  13. 异色瓢虫鞘翅色斑的群体遗传学分析,53页,Q969.496.6
  14. 果蝇Hsp22多克隆抗体的制备及其在hsp22基因转录调控研究中的应用,44页,Q969.462.2 Q813.2 Q75
  15. 果蝇抗菌肽基因defensin和cecropin B在毕赤酵母中的表达,35页,Q969.462.1 Q963 Q786
  16. 黑腹果蝇ebony突变型背甲着色图式分化机理研究,73页,Q969.462.1 Q963
  17. 黑腹果蝇种组蛋白质二维凝胶电泳技术和图谱比较,46页,Q969.462.1 Q51 Q503
  18. 黑腹果蝇种组线粒体基因进化特征与分子系统学研究,60页,Q969.462.1
  19. 吉林省部分地区异色瓢虫鞘翅色斑多态的群体遗传学分析,61页,Q969.48
  20. 黑腹果蝇抗菌肽基因Metchnikowin在毕赤酵母中分泌型表达及活性检测,54页,Q966 Q786
中图分类: > Q963 > 生物科学 > 昆虫学 > 昆虫遗传学

© 2012 book.hzu.edu.cn