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九州虫草中主要药用成分的分离和生物学活性研究

专 业: 微生物学
关键词: 九州虫草 液质联用 虫草素 纳米药物载体技术 超临界CO<,2>萃取 正交试验
分类号: Q93
形 态: 共 71 页 约 46,505 个字 约 2.225 M内容
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内容摘要


本文首先利用液质联用的方法,通过对色谱条件的优化,实现了对人工栽培九州虫草子实体中核苷类物质精确的定性和定量研究,结果表明,根据此色谱条件,即色谱柱:

Hypersil AA-ODS C<,18>柱200 mm×211 mm × 5μm;检测波长:

260nm;流速:1.0ml/min;柱温:

30℃;灵敏度:1.0AUFS;进样量:

5μ1,流动相:

99%水+1%乙腈,洗脱5分钟后梯度过渡为96%H<,2>O+4%ACE具有较好的分离效果,同时将九州虫草和冬虫夏草中核苷类物质的种类和含量进行比较,结果表明九州虫草中含有鸟苷,尿苷,腺苷,2’-脱氧腺苷和3’-脱氧腺苷五种核苷类物质,种类多于冬虫夏草;且九州虫草中虫草素即3’-脱氧腺苷的含量为4.356mg/l,明显高于冬虫夏草。

因此人工栽培九州虫草可作为虫草素的主要天然来源。

在对虫草素3’-脱氧腺苷的临床前期研究中发现,人体内的腺苷脱氨酶易使其脱氨基转化为3’-脱氧肌苷,从而失去药效。

如何提高虫草素的药效、减少用量、降低成本成为目前虫草素临床应用研究的热点和难点。

随着对纳米药物载体技术的广泛研究,科研人员正尝试将此项技术与中药研究相结合。

因此本论文将纳米药物载体技术应用于虫草素的研究,本文采用非稳态共沉淀法制备层状双氢氧化合物LDH,以人工栽培的九州虫草为原料,分离纯化出虫草素样品,并通过毛细管电泳的方法对提取的样品进行精确的定性和定量研究,然后在特定的条件下将二者通过纳米插层技术相互作用,从而制备了虫草素/LDH生物纳米复合物,并通过透射电镜技术、红外光谱分析、X—射线衍射和毛细管电泳技术对所制备的产物进行性能表征,证实了虫草素确实插层成功并且插层后的虫草素分子具备生物完整性,没有发生结构和性质的改变。

最后对该生物纳米复合物进行了体外抑瘤活性的初步研究,结果表明它能够很好的抑制肿瘤细胞U937的生长,其抑瘤效果明显高于等量的虫草素样品。

同时本文又利用超临界CO<,2>萃取技术等,通过单因子实验和正交实验相结合的方法对九州虫草中另一重要活性成分黄酮类化合物进行分离纯化,并从黄酮类化合物的得率和种类两个方面与传统提取方法进行比较,探索出了黄酮类化合

物的最佳提取工艺,即萃取压力25Mpa,萃取温度60℃,萃取时间120min,7ml70%的乙醇作为夹带剂,CO<,2>流速为0.6ml/min。

黄酮类化合物的最高提取得率为,10.058mg/g。

根据提取物的颜色反应特征和全波长扫描图的峰形特征对分离提取物进行初步的定性分析,结果表明本实验中所获得样品确实为黄酮类化合物,最后从抗氧化活性和抑菌活性两个方面对黄酮类化合物的粗提物进行初步的生物学活性研究,为九州虫草药用价值的研究提供了有用的数据参考..……

全文目录


文摘
英文文摘
论文说明:论文缩写词表
第一章 绪论
第二章 九州虫草中核苷类成分定性和定量分析
第三章 虫草素纳米复合物的制备及体外抑瘤活性的初步研究
第四章 超临界—CO2流体萃取法提取九州虫草中黄酮类化合物
第五章 九州虫草中黄酮类化合物的生物学活性研究
总结和展望
参考文献
所获奖励

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