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电泳技术在凋亡细胞检测及生物大分子中的应用

专 业: 分析化学
关键词: 高效毛细管电泳 细胞凋亡 大鼠小脑 颗粒细胞 醋酸纤维素膜 血红蛋白
分类号: O65
形 态: 共 61 页 约 39,955 个字 约 1.911 M内容
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内容摘要


该文分为两个部分,第一部分建立了用毛细管电泳的方法检测由MPP<+>致凋的大鼠小脑颗粒细胞的凋亡情况。

首先建立了大鼠小脑颗粒细胞凋亡模型,用甲基绿-派诺宁染色,DNA的琼脂糖电泳和LDH漏出率实验证明,所建立的模型是成功的。

在此基础上,建立了用毛细管电泳的方法检测大鼠小脑颗粒细胞的凋亡情况,并对影响结果的各条件做了优化,包括:毛细管内径对分离效果的影响,缓冲液pH变化对峰高的影响,分离电压对分离度的影响,致凋剂浓度和致凋时间对凋亡细胞相对百分含量的影响。

凋亡细胞迁移时间和吸光度的相对标准偏差分别为10。

8﹪,8。

6﹪。

第二部分用传统电泳的方法分离人类血红蛋白,用化学发光成像法检测血红蛋白F,并对发光试剂的浓度,感光时间以及电泳条件做了优化,找到了最佳的实验条件……

全文目录


摘要
第一部分 毛细管电泳检测大鼠小脑颗粒细胞凋亡
第一章 引言
一.文献综述
1.1毛细管电泳的简单历史
1.2毛细管电泳的原理
1.3毛细管电泳的应用
二本文所作的工作及意义
2.1.细胞凋亡
2.2.课题意义
第二章 实验部分
一.仪器设备与试剂
1.1.仪器
1.2.试剂
1.3.实验条件
二实验内容-细胞模型的建立:
2.1.大鼠小脑颗粒细胞原代培养方法
三.结果与讨论
3.1.大鼠CGNs原代培养
3.2.至凋后一般细胞形态观察
3.3.凋亡细胞形态学观察甲基绿-派诺宁染色
3.4.DNA琼脂粮电泳
3.5.乳酸脱氢酶LDH的活性测定
第三章 毛细管电泳检测细胞凋亡
一.凋亡细胞分离条件:
二.毛细管柱内径对分离度的影响
三.电压的影响
四.缓冲液pH对峰高的影响
五.MPP+的浓度对大鼠小脑颗料细胞百分率的影响
六.凋亡时间对凋亡细胞百分率的影响
第四章 结论
第二部分 醋酸纤维素膜电泳分离,化学发光法成像检测血红蛋白
第一章 引言
一原理概述
1.1.电泳原理
1.2.醋酸纤维素膜电泳的优点
二化学发光成像检测
2.1.基本原理
2.2.化学发光成像的优点:
三课题的意义
第二章 .实验部分
一实验内容
1.1.实验仪器:
1.2.试剂
1.3.实验方法:
第三章 结果与讨论
一.实验条件的优化:
1.1.电压的影响:
1.2.鲁米诺浓度的影响:
1.3.过氧化氢浓度的影响;
1.4.感光时间的影响:
二.结论
参考文献

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中图分类: > O65 > 数理科学和化学 > 化学 > 分析化学

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