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基因组水平上筛查昆虫抗真菌肽基因序列的研究

专 业: 特种经济动物饲养
关键词: 昆虫 抗真菌肽 基因筛查
分类号: Q963
形 态: 共 60 页 约 39,300 个字 约 1.88 M内容
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内容摘要


目前已发现的昆虫抗菌肽(Insect antimicrobial peptide)多达50多种,主要为四大类,其中天蚕素族(Cecropins)和昆虫防御素族(Insect Defensins)抗菌肽是研究得较深入的两大类。

这些已发现的抗菌肽主要对细菌具有广谱抗性,对某些病毒、原虫和癌细胞也有一定的抑制作用。

因而,近几年来,昆虫抗菌肽,特别是Cecropins簇抗菌肽基因被广泛用于生物制药和植物转基因抗病育种的研究。

该文研究目的旨在采用PCR扩增和核酸杂交方法,对31种供试昆虫在基因组水平上筛查、发现可能含有新的昆虫抗真菌肽基因序列的靶昆虫,为今后克隆鉴定新的昆虫抗真菌肽基因奠定研究基础。

论文以果蝇Drosomycin抗真菌肽因子cDNA基因序列设计合成PCR引物Dr1、Dr2和经PCR合成Drosomycin基因探针;以6种已发现的昆虫抗真菌肽因子cDNA序列和其氨基酸序列间的同源性为基础,设计合成PCR简并引物FH primer t3、t4和简并探针引物FH primer t1、t2,后者经PCR互补合成制作简并探针,分别对31种供试昆虫基因进行PCR扩增筛查和Dot-blotting点杂交、southern-blotting杂交筛查……

全文目录


文摘
1.前言
2.材料与方法
2.1材料
2.1.1供筛查的31种昆虫及其拉丁学名
2.1.2培养基
2.1.3试剂及缓冲液
2.2方法
2.2.1昆虫基因组模板DNA通用抽提方法
2.2.2筛查用基因探针与PCR引物的设计与合成
2.2.3探针的PCR合成与标记
2.2.4 PCR扩增筛查的反应体系及反应条件
2.2.5 Dot-blotting点杂交筛查方法
2.2.6基因组Southern blotting杂交筛查方法
3.结果与分析
3.1供试昆虫基因组DNA模板的制备效果
3.2筛查用Drosomycin基因探针与PCR引物设计策略
3.3简并探针与PCR引物设计策略
3.4 Drosomycin基因探针与简并探针的PCR合成
3.5基因组水平上Dot-blotting杂交筛查结果
3.6基因组水平上进行Southern-blotting筛查结果
3.7基因组水平上的PCR扩增筛查结果
4.讨论
4.1 Drosomycin引物筛查揭示的有关信息
4.2简并引物PCR扩增筛查与核酸杂交筛查揭示的有关信息
4.3点杂交与Southern-blotting杂交信号差异
5.全文结论
参考文献
英文摘要
附录-1文献综述
附录-2论文缩写词中英对照

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中图分类: > Q963 > 生物科学 > 昆虫学 > 昆虫遗传学

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