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新型手性环氧化物水解酶的筛选、特性和应用研究

专 业: 生物化工
关键词: 环氧化物水解酶 手性环氧化物 缩水甘油苯基醚 巨大芽孢杆菌 对映选择性水解 筛选
分类号: Q556  O643  O625.5
形 态: 共 103 页 约 67,465 个字 约 3.227 M内容
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内容摘要


该研究的目的就是要从自然界中寻找一到两株能高对映选择性地拆分外消旋环氧化物的环氧化物水解酶产生菌,并对酶的性质和应用进行研究。

我们首先以芳香族环氧化物缩水甘油苯基醚为唯一碳源,经过两轮筛选从100份土样中分离得到巨大芽孢杆菌ECU1001,然后依次用四个缩水甘油苯基醚结构类似化合物为底物进行四轮筛选,从对缩水甘油苯基醚具有明显活性的144株菌中又筛选得到一株酵母菌ECU1040。

这两株菌的对映选择性很高且互补,ECU1001优先水解R-环氧化物,而ECU1040则优先水解S-环氧化物,因而可以分别利用这两株菌得到同一个环氧化物的两种异构体。

我们分别对这两株菌进行了研究。

为了拓展酶的应用领域,还对这两株菌催化有有机相不对称水解反应和胺解反应进行了研究。

该研究所得到的两株菌对缩水甘油苯基醚或其结构类似化合物具有很好的对映选择性,具有一定的工业应用前景。

该研究也为进一步研究酶的性质和应用进而用于工业生产打下了良好的基础……

全文目录


文摘
英文文摘
第一章 绪论
1.1手性化合物的重要性及其研究开发现状
1.2手性化合物的制备技术
1.3生物法拆分对映体的原理
1.4光学活性环氧化物的制备
1.5环氧化物水解酶催化机理及研究应用新进展
1.6本课题的研究目的与思路
第二章 外消旋环氧化物的化学合成
2.1合成路线的设计
2.2各种环氧化物的合成
2.3本章小结
第三章 环氧化物水解酶活性的测定方法
3.1产酶菌株筛选过程中的活性测活方法
3.2酶生物合成过程中的活性测活方法
3.3酶纯化过程中的活性测活方法
3.4本章小结
第四章 环氧化物水解酶产生菌的筛选
4.1筛选方案的确定
4.2产酶菌株的筛选
4.3菌种的鉴定
4.4巨大芽孢杆菌ECU1001的诱变
4.5本章小结
第五章 环氧化物水解酶的生物合成
5.1巨大芽孢杆菌ECU1001在优化培养基上的生长与产酶特性
5.2分批补料和底物诱导对环氧化物水解酶生物合成的影响
5.3应用分批补料和底物诱导策略提高巨大芽孢杆菌ECU1001的产酶水平
5.4本章小结
第六章 环氧化物水解酶的纯化与表征
6.1纯化方案的设计
6.2酶的纯化
6.3纯化酶的底物特异性
6.4纯化酶的反应特性
6.5本章小结
第七章 巨大芽孢杆菌ECU1001冻干细胞催化环氧化物不对称水解反应的特性
7.1巨大芽孢杆菌ECU1001冻干细胞不对称水解缩水甘油苯基醚
7.2最佳反应条件的确定和S-缩水甘油苯基醚的制备
7.3巨大芽孢杆菌ECU1001冻干细胞对其它环氧化物的拆分
7.4 ECU1001催化有机相及两液相体系中缩水甘油苯基醚的不对称水解
7.5 ECU1001催化有机相中缩水甘油苯基醚的不对称胺解
7.6本章小结
第八章 环氧化物水解酶产生菌的再筛选及酵母菌ECU1040对不同环氧化物的催化拆分
8.1环氧化物水解酶产生菌的再筛选
8.2酵母菌ECU1040对不同环氧化物的拆分
8.3S-3-2-甲基苯氧基-1,2-丙二醇的制备
8.4酵母菌ECU1040催化的有机相水解和胺解反应
8.5本章小结
全文总结与展望
参考文献
附录

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中图分类: > Q556 > 生物科学 > 生物化学 > 酶 > 水解酶
其他分类: > O643 > 数理科学和化学 > 化学 > 物理化学(理论化学)、化学物理学 > 化学动力学、催化作用
其他分类: > O625.5 > 数理科学和化学 > 化学 > 有机化学 > 芳香族化合物

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