优秀研究生学位论文题录展示

小鼠脑特异表达基因Bsg4的克隆和表达研究及小鼠Cathepsin K启动子的转基因研究

专 业: 生理学·生物医学
关键词: BSG4基因 生物信息学 DENN结构域 海马 小脑 转基因小鼠
分类号: Q42
形 态: 共 61 页 约 39,955 个字 约 1.911 M内容
阅 读: 全文阅读说明

内容摘要


为了克隆小鼠头部发育过程中特异表达的新基因,并对所克隆到的新基因的可能功能进行初步分析,我们采用了消减差异筛选的方法,筛选小鼠头部特异表达的新基因,并用生物信息学的方法对克隆到的新基进行序列分析和蛋白结构域的预测,以推测其可能的功能。

同时,我们还采用了小鼠胚胎整体原位杂交、小鼠脑部切片的原位杂交以及爪蟾胚胎的整体胚胎原位杂交方法来研究新基因的表达情况。

在消减差异筛选法中,我们制备了32p标记的小鼠9。

5天胚胎脑部的cDNA探针作为受检者Tester,过量的生物素标记的小鼠9。

5天胚胎躯干mRNA作为驱动者Driver。

两者之间的消减杂交得到仅在小鼠脑部表达的32P标记的cDNA探针。

此后通过筛选小鼠胚胎的cDNA文库,克隆到一个脑特异基因,我们将之命名为BSG4Brain Specific Gene 4基因。

我们将消减差异筛选得到的BSG4的cDNA测序,其长度为3639bp。

然后将该基因cDNA序列在NCBI上做blastn的分析,与Genbank中的已知序列进行比较,证实了BSG4为一新基因。

我们向NCBI提交了该序列,其GenBank登录号GenBankAccession No。

为AY512564。

用NCBI上的0RFfinder数据库对BSG4基因的编码框进行预测,得到一个3639bp长的编码区序列,位于BSG4cDNA的607-4245核苷酸位置。

含有起始密码子ATG和终止密码子TAG,是一个完整的编码框。

在Mouse Genome数据库中做BLAST的分析得到BSG4定位在小鼠的第3号染色体上3F1-3F2.1之间,包含26个外显子,25个内含子,它们在基因组上的分布跨度约13kb。

在NCBI上blastn的分析还发现BSG4与人的一个头部发育相关基因KIAA0476具有很高的同源性。

Vector NTI Suite 8软件分析两者氨基酸序列的同源性达81.2﹪。

说明BSG4可能是在小鼠中的与人KIAA0476基因同源的,在头部特异表达,与头部发育相关的基因。

对BSG4基因结构域的分析显示该基因N末端含有一个DENN结构域,该结构域包含DENN自身以及一个dDENN结构域。

这些结构域提示BSG4基因是一个可能的与Rab家族的GTP酶相互作用或调节MAPK信号通路。

并且PSORT预测了该蛋白定位在细胞膜内的可能性为26。

1﹪,内质网中为26。

1﹪,细胞核为17。

4﹪。

以DIG标记的BSG4的全长编码区的RNA为探针,对小鼠胚胎、爪蟾胚的胚胎整体原位杂交结果显示BSG4主要在头部特异表达。

对小鼠脑组织切片的原位杂交结果显示BSG4基因在头部表达的部位只局限在小脑皮层和海马。

这提示BSG4与小脑、海马等的发育有密切关系。

对BSG4的研究将有助于我们进一步揭示脑发育的分子机理。

为了研究Cathepsin K启动子在小鼠体内的基因调控,我们构建了包含启动子的载体,运用显微注射的方法将载体导入到小鼠受精卵中。

用Southern杂交检测出转基因阳性小鼠……

全文目录


文摘
英文文摘
综述
一、MAPK信号通路
二、细胞凋亡
三、DENN结构域
四、破骨细胞的发生与破骨细胞基因调节的研究
前言
材料和方法
结果
讨论
结论
参考文献

相似论文

  1. 血管内皮生长因子对小鼠胚胎植入的作用机理,72页,Q4
  2. ClC-1氯离子通道亚型的克隆及相关电生理特性的研究,142页,Q4
  3. 云南赛葵上双生病毒的分子鉴定,64页,Q4
  4. 笼养灰叶猴(Trachypithecus phayrei)社群关系及月经周期初步研究,53页,Q4
  5. 谷氨酸钠MSG处理对文昌鱼脑泡及哈氏窝结构和功能的影响,24页,Q4
  6. 斑马鱼(Danio rerio)母源性补体因子的传递和免疫功能以及补体系统的个体发育,117页,Q4 Q178.53
  7. 粘虫免疫血淋巴中抗菌物质的研究,54页,Q4 Q5
  8. 小鼠胚胎发育过程中四种细胞周期调控基因的表达研究,66页,Q4 Q78
  9. 近代生理学在中国:1851~1926,159页,Q4-4
  10. 生理学中基于问题学习模式及其教学中教师角色的探讨,89页,Q4-40 G642
  11. 大绒鼠和高山姬鼠体温调节和产热特征的比较研究,111页,Q413 Q959.837
  12. C型钠尿肽对家兔心房动力学和环核苷酸含量的影响,33页,Q414 Q424 Q524 Q95-33
  13. 性腺激素和促性腺激素释放激素受体在绵羊垂体发育过程中的表达,78页,Q418
  14. 生命早期低铁干预对大鼠成年铁代谢的影响,46页,Q418 Q493.7
  15. 小鼠早期胚胎发育过程中细胞凋亡及凋亡基因表达的检测,41页,Q418 Q132.7
  16. hBMP-7的定点突变及其在甲醇酵母中的表达鉴定,76页,Q418 Q591
  17. 人骨形成蛋白-4和人骨形成蛋白-7在毕赤酵母中的共表达及其纯化,78页,Q418 Q591
  18. p27〈kip1〉在小鼠卵巢发育中的控制作用,83页,Q418 Q781
  19. p27〈’kip1〉在小鼠卵巢发育中的控制作用,83页,Q418 Q781
  20. 比较不同胚胎时期神经干细胞的增殖、分化和凋亡,50页,Q418 R741
中图分类: > Q42 > 生物科学 > 生理学 > 神经生理学

© 2012 book.hzu.edu.cn