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人源抗HIV-1gp120趋化蛋白受体结合位点单克隆Fab抗体基因的获得

专 业: 传染病学
关键词: 噬菌体抗体库 单克隆抗体 人免疫缺陷病毒1型
分类号: R511
形 态: 共 51 页 约 33,405 个字 约 1.598 M内容
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内容摘要


我们分别根据人免疫球蛋白重链Fd段和k链的5、3端基因序列合成了二对引物,以抗人免疫缺陷病毒1型HIV-1抗体阳性患者外周血淋巴细胞中提取的mRNA为模板,通过逆转录聚合酶链反应RT-PCR分别扩增出了Fd和k链基因片段,插入载体pComb3,以电击法转化大肠杆菌TG1,建立了库容量为10<13>CFU/ml的人源噬菌体Fab抗体库。

同时根据HIV-1gp120趋化蛋白受体结合位点的氨基酸序列合成了含有Arg-419、Ile-420、Lys-421、Gln-422、Pro-438的23肽,并以此23肽为固相抗原,经过6轮吸附-洗脱-扩增的筛选和ELISA法、dotblot检测,从中获得了7个抗HIV-lgp120趋化蛋白受体结合位点的人源Fab抗体克隆。

研究结果表明:

应用噬菌体抗体库技术获得人源抗HIV-1gp120趋化蛋白受体结合位点23肽的噬菌体Fab单克隆抗体具有较好的特异性和较高的亲合力,能够有效地与抗gzp12023肽阳性抗血清竞争并封闭gp120的趋化蛋白受体结合位点,为进一步寻长有效阻止HIV-1感染人体靶细胞的基因工程药物打下了一定的基础……

全文目录


中文摘要
英文摘要
前言
第一章 人源抗HIV-1噬菌体Fab抗体库的建立
1材料与方法
2结果
3讨论
第二章 抗HIV-1gp120趋化蛋白受体结合位点Fab单克隆抗体的筛选
1材料与方法
2结果
3讨论
第三章 人源抗HIV-1gp120阳性噬菌体Fab单克隆抗体基因序列的分析
1材料与方法
2结果
3讨论
结语
参考文献
综述
参考文献

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中图分类: > R511 > 医药、卫生 > 内科学 > 传染病 > 病毒传染病

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