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抗脊髓灰质炎病毒Ⅱ型Sabin株D抗原单克隆抗体的制备及其在Sabin IPV效力检测中的应用

专 业: 生物化学与分子生物学
关键词: 脊髓灰质炎病毒 Sabin株 D抗原 单克隆抗体
分类号: Q81
形 态: 共 64 页 约 41,920 个字 约 2.005 M内容
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内容摘要


脊髓灰质炎poliomyelitis脊灰是一种传播广泛、侵犯中枢神经系统的病毒性传染病,自1988年实施消灭脊髓灰质炎脊灰战略以来,我国通过接种口服脊髓灰质炎减毒活疫苗OPV消灭了本土野毒株引起的脊髓灰质炎。

但是仍存在OPV引起的疫苗相关麻痹病例VAPP和疫苗衍生株VDPV,脊髓灰质炎灭活疫苗IPV基本可避免OPV上述缺点。

WHO指出当全球证实消除脊灰后,将停止使用OPV,届时可能需要脊髓灰质炎灭活疫苗IPV来长期保持脊灰免疫水平。

相对于野毒株IPV,Sabin株IPV在制造和使用过程中更安全,对它的研究受到了WHO的高度重视。

目前生产减毒株灭活疫苗的国家有中国、日本及荷兰。

我所正在积极研制Sabin IPV,D抗原量是体外测定IPV效力的关键指标,与疫苗在人体内免疫效力有较好的一致性。

目前国际上尚缺乏Sabin IPV D抗原检测的标准化的试剂,本实验应用杂交瘤技术所制备的抗Ⅱ型Sabin株D抗原单克隆抗体分子量为150KD;纯化抗体的ELISA效价为1:2.4×10<6>,中和抗体效价为1:1.3×10<4>:

与II型Sabin株C抗原、Ⅰ型、Ⅲ型Sabin病毒抗原不发生交叉反应,特异性良好。

并用此单克隆抗体的ELISA法与本室建立的多抗方法进行比较,同时对三价Sabin IPV疫苗中Ⅱ型D抗原的含量进行测量,发现在0.125Du/ml-2 Du/ml范围内应用单抗测量D抗原的直线相关系数为0.998、0.966、0.903;而使用本室建立的多抗方法直线相关系数为1.000、0.998、0.986。

本实验制备的单克隆抗体具有良好的特异性,可为Sabin IPV体外效力检测的标准化奠定基础..……

全文目录


摘要
英文摘要
前言
一、实验材料和方法
二、结果和分析
三、讨论
四、小结
五、参考文献
六、论文综述疫苗衍生脊髓灰质炎病毒最新研究进展
论文综述体外大规模培养杂交瘤细胞生产单克隆抗体生产技术研究进展
七、附录一
八、附录二

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中图分类: > Q81 > 生物科学 > 生物工程学(生物技术)

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