优秀研究生学位论文题录展示

人ATP结合盒超家族蛋白相互作用蛋白的规模化发掘

专 业: 内科学感染病
关键词: 酵母双杂交 ATP 家族转运蛋白 蛋白质相互作用
分类号: R51  Q51
形 态: 共 75 页 约 49,125 个字 约 2.35 M内容
阅 读: 全文阅读说明

内容摘要


ATP结合盒超家族转运蛋白TheATP-bindingcassetteABCtransportersuperfamily属于一类分布广泛、数目众多的跨膜转运体系。

它们可以转运代谢产物、离子、糖、氨基酸、脂类、固醇以及药物等多种底物通过细胞内、外膜。

一些特定的ABC转运蛋白在多药耐性的肿瘤细胞系或癌症过表达,与临床耐药密切相关。

这些基因的突变可能直接和间接导致多种遗传疾病。

而目前关于ATP结合盒超家族转运蛋白具体转运机制以及功能还未完全了解。

关于其与细胞内蛋白的相互作用研究甚少。

规模化进行蛋白质相互作用研究可能发现其更精确的转运调节机制并揭示新的功能。

蛋白质-蛋白质相互作用是一切生命活动的基础,揭示相互作用规律是认识生命奥秘的必经之路。

酵母双杂交技术是目前应用最成功的大规模研究蛋白质相互作用的技术平台,规模化酵母双杂交技术不是常规实验室酵母双杂交技术在诱饵数量上的简单增加,需要解决大量的技术问题。

本文以ATP结合盒超家族转运蛋白为研究对象,摸索规模化酵母双杂交研究蛋白质相互作用的技术条件,优化各关键技术环节,完善可用于规模化蛋白相互作用研究的酵母双杂交技术平台;发现20对高可信的蛋白相互作用。

结果对采用酵母双杂交技术规模化研究蛋白质相互作用提供可借鉴的经验,发现的相互作用有助于揭示ABC蛋白的转运机制,并为其新功能的认识提供重要的功能线索。

本文采用酵母双杂交技术,选取具有重要功能,代表6类亚家族的14种ATP结合盒超家族转运蛋白ABCA1、ABCA5、ABCA6、ABCB1、ABCB11、ABCB4、ABCC1、ABCC13、ABCC2、ABCC3、ABCC5、ABCC6、ABCF1、ABCG8的胞质区C端或者N端为诱饵,筛选成人肝cDNA文库,得到67种不同的相互作用。

在对相互作用数据的初步分析中,除去不符合读框和常见假阳性,经过回转验证,得到20对可信度较高的相互作用。

这些相互作用提示ATP结合盒超家族转运蛋白可能有许多新的功能,同时也揭示可能存在共同的转运机制。

如发现ABCC2与NF-κB1的相互作用,提示ABBC2可能作为一个受体,参与NF-κB信号通路的激活和调节。

用GOgeneontology进行功能注释,发现相互作用蛋白中有参与物质转运过程的,也有参与细胞信号转导等其它生理学过程的,表明ABC蛋白除了发挥物质转运的功能外,还可能参与信号转导、细胞凋亡、增殖等过程调控。

蛋白质-蛋白质相互作用是一切生命活动的基础,揭示相互作用规律是认识生命奥秘的必经之路。

蛋白质相互作用研究从规模上分为单个相互作用研究和相互作用组研究。

相互作用研究的主要实验技术有:

酵母双杂交技术、串联亲和纯化技术、免疫共沉淀技术、GST沉淀实验技术等。

生物信息学也是相互作用组研究重要的补充手段。

揭示生命活动规律的最终方法还是要回归到单个相互作用生理意义、以及由此引发的规律化认识..……

全文目录


主要英文缩写一览表
英文摘要
摘要
主要仪器设备和常用试剂的配制
前言
第一部分 诱饵基因的选择与酵母双杂交诱饵载体的构建
第二部分 人ATP结合盒超家族转运蛋白相互作用蛋白的规模化发掘
全文总结
本研究的创新之处及存在问题及展望
参考文献
文献综述蛋白质相互作用研究技术方法和应用

相似论文

  1. 慢性乙型病毒性肝炎病人CCR5基因表达的多态性研究,38页,R512.62
  2. ALT正常的HBV慢性携带者肝组织病理结果分析,45页,R512.6
  3. siRNA抑制乙型肝炎病毒的复制和表达的实验研究,104页,R512.62
  4. 可溶性TGF-β〈,1〉Ⅱ型受体逆转录病毒表达载体的构建及其对外源性TGF-β〈,1〉拮抗作用,101页,R575.2 R457.2
  5. P16〈INK4a〉与E2F-1在增生性肾炎肾组织的表达及临床意义,44页,R5
  6. CyclinD1与CDK4在增生性肾炎肾组织的表达及临床意义,48页,R5
  7. 感染病人血清sTNFR-I、G-CSF水平的临床研究,27页,R5
  8. 基质金属蛋白酶-3基因启动子5A/6A多态性与高血压病关系的研究,46页,R5
  9. 上海市浦东新区居民血糖状况调查分析,35页,R5 R181.32 R587.1
  10. 糖尿病患者胰岛β细胞功能的变化及其影响因素研究,33页,R5 R181.32 R587.1
  11. PPARs配体对巨噬、泡沫细胞生物学活性的影响,73页,R5 R392.11 R541.4
  12. 深圳市外来人口结核病流行特征及管理效果的评价,45页,R5 R52
  13. 大鼠肝纤维化自发逆转过程中HSC凋亡与p75表达实验研究,38页,R5 R575.2 R392.1
  14. 彩色多普勒血流显像在监测肝硬化并发症中的价值,55页,R5 R575.2 R445.1
  15. 环氧合酶-2及其抑制剂对重症急性胰腺炎影响的实验研究,58页,R5 R576
  16. eNOS基因转染抑制血管损伤后平滑肌细胞增生的实验研究,61页,R5 R654.2 R457.2
  17. AGEs诱导足细胞表达MCP-1以及细胞内信号传导机制的实验研究,54页,R5 R692.310.2
  18. 抗β<,1>肾上腺素受体细胞外第二环自身抗体导致大鼠多脏器损伤及其相关机制,137页,R502 R-332
  19. 投放有免疫力的蚊子对疟疾病控制的影响,51页,R503 R531.3
  20. 链格孢霉变应原的实验研究,93页,R503 R562.25 R765
中图分类: > R51 > 医药、卫生 > 内科学 > 传染病
其他分类: > Q51 > 生物科学 > 生物化学 > 蛋白质

© 2012 book.hzu.edu.cn