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p27〈’kip1〉在小鼠卵巢发育中的控制作用

专 业: 微生物学
关键词: 卵巢发育 卵巢滤泡 基因修饰
分类号: Q418  Q781
形 态: 共 83 页 约 54,365 个字 约 2.601 M内容
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内容摘要


本文对p27<’kip1>在小鼠卵巢发育中的控制作用进行了研究。

文章利用基因修饰小鼠模型对此进行了深入细致的研究,获得了一些有力的证据,表明周期蛋白依赖性激酶cdk的抑制因子p27<’kIPL>p27是通过抑制原始滤泡的形成和活化、促进原始滤泡死亡来控制卵巢发育的。

研究表明:

p27是决定哺乳动物卵巢发育的关键分子之一。

p27是卵巢原始滤泡形成和活化的抑制因子,是原始滤泡闭锁退化的促进因子,是黄体分化的重要因子。

提出了小鼠卵巢中p2 7缺失可以导致滤泡发育缺陷,从而引起卵巢功能失调和多种病理变化。

这项研究中的发现为人类由于卵巢遗传畸变而导致滤泡发育缺陷的疾病提供了有力的理论依据,使我们能够深入了解人类卵巢功能早衰等导致不孕的疾病..……

全文目录


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符号说明
第一章 哺乳动物卵巢发育的研究背景
一、哺乳动物的卵巢
1.卵巢的发育过程
2.卵母细胞和滤泡的分类
二、滤泡的活化和早期发育
1.原始滤泡的形成
2.原始滤泡的活化
3.滤泡的闭锁退化
4.不同发育阶段滤泡的形成规律
三、卵母细胞和粒层细胞之间的双向交流
四、卵母细胞内在的信号途径
1.磷酯酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol-3 kinase,PI3K)
2.磷酯酰肌醇-3激酶的活化方式
3.Ⅰ a型磷酯酰肌醇-3激酶途径PI3K途径
4.卵母细胞Ⅰ a型磷酯酰肌醇-3激酶信号途径的激活方式
5.卵母细胞内在的信号途径
五、基因修饰小鼠在研究中的应用
1.Sl位点自发突变小鼠模型
2.受体蛋白酪氨酸激酶中酪氨酸突变小鼠模型
3.Foxo3a基因的影响
六、本课题的研究目标
第二章 实验材料和方法
第一节 小鼠的株型
一、小鼠的饲养条件
二、C57BL/6J小鼠
三、p27缺失p27-/-小鼠
四、p27和Cdk2共同缺失p27-/-Cdk2-/-小鼠
第二节 小鼠基因型的确定
一、基因组DNA的提取
二、基因扩增
三、琼脂糖凝胶电泳
四、基因型确定
第三节 确定卵母细胞和滤泡的数量
一、取材和固定
二、包埋
三、切片
四、染色计数
第四节 蛋白质表达水平的测定
一、试剂和溶液
二、蛋白质表达水平的测定
第五节 卵母细胞的分离和培养
一、试剂和溶液
二、卵母细胞的分离
三、干细胞因子SCF体外培养卵母细胞
四、体外培养卵母细胞的饥饿实验
五、免疫共沉淀实验(Imunoprecipitation)
第六节 卵巢中相关激酶活性的测定
一、试剂和溶液
二、相关激酶活性的测定
第三章 结果和讨论
一、p27对小鼠卵巢中原始滤泡形成的影响
1.p27缺失对小鼠卵巢中原始滤泡形成的影响
2.p27缺失小鼠中Cdk2对卵巢中原始滤泡形成的影响
3.结论和展望
二、p27对小鼠卵巢中原始滤泡活性的影响
1.p27缺失对小鼠卵巢中原始滤泡活性的影响
2.p27缺失对小鼠卵巢中卵母细胞磷酯酰肌醇-3激酶途径的影响
3.结论和展望
三、p27对小鼠卵巢中性成熟前原始滤泡死亡的影响
1.p27缺失对小鼠卵巢中性成熟前原始滤泡闭锁退化的影响
2.p27缺失小鼠卵巢中原始滤泡死亡的影响因素
3.结论和展望
附表、图
参考文献

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中图分类: > Q418 > 生物科学 > 生理学 > 普通生理学 > 生长、发育与生殖
其他分类: > Q781 > 生物科学 > 分子生物学 > 基因工程(遗传工程) > 目的基因的获得

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