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鲨鱼皮和猪皮胶原蛋白及其抗氧化活性肽的特性研究

专 业: 水产品加工与贮藏工程
关键词: 鱼皮 猪皮胶原 白及 抗氧化 活性肽
分类号: TS5  X71
形 态: 共 42 页 约 27,510 个字 约 1.316 M内容
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内容摘要


本文以清除DPPH自由基的能力为主要依据,通过鲨鱼皮和猪皮中胶原蛋白部分特性及其比较,生物酶法制备胶原小分子肽及其初步分离研究,抗氧化肽部分特性研究等五部分内容研究了鲨鱼皮和猪皮胶原蛋白及其抗氧化活性肽的特性。

1、通过鲨鱼皮和猪皮胶原蛋白的得率、电泳、二级结构、变性温度等试验,研究并比较了鲨鱼皮和猪皮中胶原蛋白部分特性。

结果表明(1)鲨鱼皮和猪皮胶原蛋白羟脯氨酸含量分别为10.32mg\g和15.47mg\g,以鲜重为基数,得率分别是8.27%和14.36%;(2)两者胶原蛋白均为I型,分子量均分布在110KD附近和200KD附近;(3)二级结构显示鲨鱼皮胶原蛋白含有51%的β-折叠和49%的无规卷曲,猪皮胶原蛋白含有44.9%的β-折叠和55.1%的无规卷曲;(4)DSC结果显示鲨鱼皮Ts=61.1℃,猪皮Ts=47.8℃,这个结果符合鲨鱼皮胶原蛋白比猪皮胶原蛋白的β-折叠含量高这一特点;(5)紫外连续扫描结果显示鲨鱼皮胶原蛋白紫外扫描波长为230nm,猪皮为222nm,两者均在胶原蛋白特征波长范围之内。

2、通过生物酶法制备胶原小分子肽及其初步分离实验,研究确定了酶解猪皮胶原蛋白获得抗氧化活性肽的最佳酶解组合;并利用DPPH方法测定猪皮胶原蛋白肽清除自由基能力,以清除DPPH自由基的能力为指标,利用超滤、柱层析等方法对所得的水解液进行分离纯化,筛选活性最高的组分。

结果显示:

(1)以清除·OH自由基的能力为指标测得胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和菠萝蛋白酶的最佳酶解时间分别为5h、5h、5h和4h;(2)胃蛋白酶→木瓜蛋白酶→菠萝蛋白酶依次酶解得到的酶解液抗氧化活性相对较高,因此确定为最佳酶解组合;(3)水解液经分离纯化得到了三种具有较高抗氧化活性的肽。

3、为了进一步研究猪皮胶原蛋白肽的生物活性,本试验对酶解液以及最终得到的具有抗氧化活性的蛋白多肽进行了部分理化特性的研究,通过氨基酸组分分析、抑菌圈测定、小分子多肽电泳等方法进行理化性质的研究。

结果显示:

(1)氨基酸组分分析显示P1’、P2’和P3’组分含具有自由基清除作用的关键氨基酸甲硫氨酸、酪氨酸和组氨酸等;(2)通过抑菌试验的初步研究可知酶解液具有抑菌活性,但具体是哪一种物质以及抑菌机理需要进一步的研究确定;(3)将P1’、P2’和P3’组分进行电泳,结果显示P1’中的各组分分子量均在20KDa左右,P3’中仍含有三条肽链,此三条链的分子量分别约为21KDa、12 KDa和6.5 KDa,因为本试验采用的是SDS-PAGE电泳,其中的SDS具有变性剂的作用,所以P3’中的三条链是呈三股螺旋结构还是分开的,需要进一步的研究P3’组分的构象来确定..……

全文目录


文摘
英文文摘
前言
1胶原蛋白
1.1胶原蛋白的来源
1.2胶原蛋白的结构及性质
1.3胶原蛋白的提取方法
1.4我国胶原蛋白的利用现状
2小分子多肽的功能及利用
3抗氧化活性
4理论依据
参考文献
第一章 鲨鱼皮和猪皮胶原蛋白部分特性比较
1材料与方法
1.1试剂与仪器
1.2实验方法
2结果与讨论
2.1胶原蛋白回收率
2.2分子量差异
2.3二级结构差异
2.4变性温度差异
2.5紫外吸收波长差异
参考文献
第二章 :生物酶法制备胶原小分子肽及其初步分离研究
1材料与方法
1.1试剂与仪器
1.2实验方法
2结果与讨论
2.1最佳酶解时间
2.2最适蛋白酶组合的确定
2.3抗氧化活性肽的分离及纯化
参考文献
第三章 :抗氧化肽部分特性研究
1材料与方法
1.1试剂与仪器
1.2实验方法
2结果与讨论
2.1抗氧化活性肽的分子量
2.2抑菌结果
2.3氨基酸组成
参考文献
第四章 主要研究结论和后续研究设想
1.主要研究结论
2.后续研究设想

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中图分类: > TS5 > 工业技术 > 轻工业、手工业 > 皮革工业
其他分类: > X71 > 环境科学、安全科学 > 废物处理与综合利用 > 农业废物处理与综合利用

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